Stanovení virginiamycinu metodou HPLC

Validační parametry

Přesnost

Mez stanovitelnosti

Linearita

Přesnost

Přesnost metody je definována jako těsnost shody získané hodnoty s jeho hodnotou skutečnou přijatou referenční hodnotou. Jedná se tedy o statisticky významnou rozdílnost mezi získanou a skutečnou hodnotou. Nalezené hodnoty modelového vzorku byly s očekávanými hodnotami srovnány pomocí lineární regrese. Očekávané hodnoty byly považovány za nezávisle proměnné, nalezené hodnoty jako závisle proměnné.

Statistické parametry
Očekávaná hodnota [mg/kg]	8,0	20,0	30,0	50,0
Nalezená hodnota [mg/kg]	8,05	19,99	29,70	51,26
Výtěžek metody [%]	100,6	99,9	99,0	102,5
Směrodatná odchylka [mg/kg]	0,096	0,173	0,94	0,386

Konstanta a regresního vztahu (konstantní soustavná odchylka) má hodnotu -0,5259 a statisticky se neliší od nuly, konstanta b regresního vztahu (proporcionální soustavná odchylka) má hodnotu 1,0287 a neliší se statisticky od jedničky.

Mez detekce a mez stanovitelnosti

Mez detekce a mez stanovitelnosti byla vypočtena z kalibračního modelu, kdy mez detekce odpovídá hodnotě koncentrace, pro kterou je dolní mez (1-a)%ního intervalu spolehlivosti predikce signálu z kalibračního modelu rovna kritické úrovni a mez stanovitelnosti je nejmenší hodnota signálu, pro kterou je relativní směrodatná odchylka predikce z kalibračního modelu dostatečně malá a obyčejně se pokládá hodnotě 0,1.

Virginiamycin S₁

       Mez detekce má hodnotu 0,17 mg/l, tj. pro danou standardní operační proceduru 0,68 mg/kg a mez stanovitelnosti má hodnotu 0,18 mg/l, tj. pro danou standardní operační proceduru 0,72 mg/kg.

Virginiamycin M₁

       Mez detekce má hodnotu 0,55 mg/l, tj. pro danou standardní operační proceduru 2,2 mg/kg a mez stanovitelnosti má hodnotu 0,56 mg/l, tj. pro danou standardní operační proceduru 2,2 mg/kg.

Linearita

       Při lineární kalibraci je testována volba vhodného kalibračního modelu a výpočet odhadu jeho parametrů a výpočet směrodatné odchylky. Při výpočtu hodnot koeficientů a, b se vycházelo z platnosti modelu regresní závislosti, který předpokládá konstantní rozptyl pro všechny hodnoty závisle proměnné - použití metody nejmenších čtverců.

            Vypočtené hodnoty koeficientů a,b a jejich statistické parametry jsou uvedeny v tabulce III.

Vypočtené hodnoty koeficientů a,b a jejich statistické parametry - virginiamycin S₁

Parametr	Odhad	STD^a	L1,2^b
a	48 732	35 339	152 052
b	2 812 446	15 210	65 446

a - směrodatná odchylka, b - L_1,2 - interval spolehlivosti

Vypočtené hodnoty koeficientů a,b a jejich statistické parametry - virginiamycin M₁

Parametr	Odhad	STD^a	L1,2^b
a	4 577	2 436	10 481
b	58 718	353	1 520

a - směrodatná odchylka, b - L_1,2 - interval spolehlivosti

Chromatogram.

top of page