Sulfonamidy

 

Stanovení sulfonamidů v krmivech metodou HPLC

Sulfonamidy jsou deriváty benzensulfonamidu.  Sulfonamidy  se extrahují ze zkušebního vzorku směsným rozpouš­tědlem aceton-pufr, extrakt se vyčeří Carrezovými činidly a přečistí se reextrakcí hexanem a dichlormethanem (chloroformem). V alikvotní části dichlormethanového (chlorofor­mového) extraktu, po převedení do mobilní fáze, se stanoví sulfonamidy metodou HPLC na reverzní fázi C18 gradientovou elucí s UV detekcí při vlnové délce 268 nm. Metoda je použitelná pro ob­sahy od 2 mg/kg do 100 g/kg pro následující sulfonamidy - sulfachlorpyridazin, sulfadiazin, sulfadimidin, sulfadimethoxin, sulfamerazin, sulfamethoxypyridazin, sulfamethizol, sulfamethoxazol, sulfapyridin a sulfachinoxalin. Chromatogramy. K separaci všech složek je nutné použít gradientovou eluci.

Alternativní metodou stanovení sulfonamidů v premixech je spektrofotometrická metoda. Metoda je založena na diazotační reakce sulfonamidů s dusitanem sodným a následné kopulaci s N-[naftyl-(1)]-ethylendiaminem za vzniku azobarviva s absorpčním maximem při 539-540 nm. Absorpční spektrum.  Reakční mechanismus diazotace a kopulace je popsán zde.