ROBENIDIN

 

Robenidin,  1,3-bis-(p-chlorbenziliden­amino)-guanidin, se používá jako antikokcidikum a chemoterapeutikum ve výkrmu kuřat, krůťat a králíků v preventivní dávce 30-66 mg/kg.

Stanovení robenidinu (RTF formát; 48,7 kB) v krmivech metodou HPLC (PDF formát; 54,7 kB). Robenidin se stanoví po extrakci vzorku okyseleným  roztokem methanolu (kyselinou chlorovodíkovou), jeho přečištěním na pevné fázi (kyselý oxid hlinitý - SepPak Alumina A), me­todou HPLC na reverzní fázi C18 metodou iontové párové chromatografie s UV-detekcí při vlnové dél­ce 314 nm. Separace robenidinu v reálném vzorku – chromatogram. Tato metoda stanovení robenidinu je validována.

Při použití mobilních fází obsahující pufry dochází většinou k chvostování píku robenidinu. Toto je možno odstranit právě použitím iontových párů, použitím speciálních kolon (např. XTerra, Waters, ABZ+ Plus, SUPELCO).

Pro stanovení nízkých koncentrací robenidinu v krmivech se využívá derivatizační reakce robenidinu s dansylchloridem za vzniku derivátu, který je přečištěn na pevné fázi Silica.[1] Derivatizační reakce probíhá v dichlormethanu v přítomnosti dimethylaminopyridinu jako katalyzátoru (organická báze) při teplotě 60 – 80 °C po dobu 60 minut. Separace derivátu probíhá na normální fázi silikagelu Zorbax Sil (5 mm silica, 250x4,6 mm) za použití mobilní fáze o složení chloroform-hexan-tetrahydrofuran-methanol (50:50:2:1). K detekci se používá fluorescenční detekce (excitační vlnová délka 320 nm, emisní vlnová délka 485 nm). Mez detekce je 0,4 mg/ml.


Literatura


[1] Cohen H., Armstrong F., Campbell H.: J. Chromatogr. A, 694, 407 (1995).