Nikarbazin se v kombinaci s narasinem v poměru 1:1 jako účinné antikokcidikum v dávce 60 – 70 mg/kg ve výkrmu kuřat s ochranou lhůtou 7 dnů.
Stanovení nikarbazinu.
Metoda HPLC stanovení nikarbazinu v krmivech a premixech byla poprvé popsána v roce 1987.[1] Nikarbazin se extrahuje 15 minut dimethylformamidem při 100 °C, extrakt se po odstředění analyzuje na reverzní fázi C18 (Bondapak C18) za použití mobilní fáze methanol – voda (7+3) s UV detekcí 365 nm. Byla popsána i metoda stanovení nikarbazinu pro nízké obsahy řádově v mg/kg.[2] Nikarbazin je extrahován acetonitrilem a extrakt je přečištěn na bazickém oxidu hlinitém a poté je extrakt analyzován na reverzní fázi (Wakosil 5C18-200) s mobilní fází acetonitril – voda (1+1). Výtěžnost metody pro obsahy od 0,1 do 1,0 mg/kg je 104,8 % (směrodatná odchylka 5,0 %). Byla popsána rovněž mikro-HPLC metoda stanovení nikarbazinu v kuřecích tkáních, vajíčkách, krmivech pro brojlery a kuřecích výkalech.[3] Metoda je poměrně univerzální – nikarbazin se extrahuje opakovaně acetonitrilem a poté se nikarbazin reextrahuje do dichlormethanu v přítomnosti pevného chloridu sodného. Organická fáze dichlormethanu se vysuší přefiltrováním přes vrstvu bezvodého síranu sodného a extrakt je odpařen za vakua k suchu při teplotě 45-50 °C. Odparek se převede do centrifugační zkumavky, rozpustí se ve 2 ml roztoku methanol- acetonitril - voda (5+3+2), přidá se 1 ml hexanu a 4krát 1 ml acetonitrilu a opět se odpaří k suchu při teplotě 50 °C pro proudem dusíku. Odparek se opět rozpustí ve 2 ml směsi methanol- acetonitril - voda (5+3+2), přidá se 0,5 ml hexanu a extrakt se odstředí a k analýze se použije vodná fáze. Analyzuje se na reverzní fázi C18 (Supelcosil LC-18, 300x1,0 mm) za použití mobilní fáze acetonitril + 0,1 M octanový pufr pH 4,8 (7+3) při průtoku 0,03 ml/min s UV detekcí při 340 nm. Výtěžnost metody je 76.8-95.9% a detekční limit je 25 pg. Ke stanovení residuí nikarbazinu v krmivech, vajíčkách a tkáních byla použita také superkritické fluidní extrakce[4] oxidem uhličitým při teplotě 85 °C a tlaku 4000 PSI. Extrakt je analyzován na reverzní fázi (APEX ODS) za použití mobilní fáze acetonitril – voda (55+45) s UV detekcí 344 nm. Mez stanovitelnosti je 0,4 mg/kg a výtěžnost metody 93 – 110 %. Velice jednoduchá metoda stanovení nikarbazinu v krmivech bez přečištění matrice byla popsána v roce 2000.[5] Nikarbazin je extrahován extrakčním roztokem acetonitril – voda (4+1) a extrakt je po filtraci přímo analyzován a reverzní fázi C18 s UV detekcí při 340 nm. Detekční limit je 0,25 mg/kg a mez stanovitelnosti je 0,5 mg/kg. Výtěžnost metody se pohybuje v rozmezí od 95,2 do 101,8 %. Chromatogram stanovení nikarbazinu v krmivech (40 mg/kg, krmná směs pro brojlery) metodou HPLC. HPLC podmínky: kolona – Symmetry C18; mobilní fáze – acetonitril – voda (57+43); UV detekce – 351 nm; průtok – 0,8 ml/min, T = 40 °C, nástřik – 10 ml.
[1] Koyama N., Shimada H.: Chikusan no Kenkyu 41(5), 589 (1987) (CA: 107:114350).
[2] Ishibashi T.: Shiryo Kenkyu Hokoku 19, 100 (1994) (CA: 121:254024 ).
[3] Draisci R., Lucentini L., Boria P., Lucarelli C.: J. Chromatogr., A 697(1-2), 407 (1995).
[4] Matabudul D.K., Crosby N.T., Sumar S.: Analyst 124(4), 499 (1999).
[5] Krabel B.J., Dickson D.A., Zimmerman A.G., Coleman M.R.: J.Assoc.Off.Anal. Chem. Int. 83(5), 1027 (2000).
