DECOQUNIATE
Decoquinate je derivátem chinolinu a používá se jako antikokcidikum, dnes je již jeho dávkování do finálních krmiv v EU i ČR zakázáno.
Jednoduchou metodu stanovení decoquinatu bez předchozí předseparace popsal Kinoshita.[1] Decoquinat je extrahován chloroformem a po vysušení extraktu byl extrakt analyzován na koloně Wakosil 5C18 s fluorescenční detekcí. Průměrná hodnota výtěžnosti metody je 95,7 % a směrodatná odchylka stanovení 8,2 %. Stejný autor pospal i metodu stanovení decoquinatu v premixech i krmných směsí.[2] Decoquinat je extrahován extrakčním rozpouštědlem 1% CaCl2 – methanol (9+1) nebo methanol – chloroform (9+1) a po naředění extraktu je vzorek analyzován na reverzní fázi (Bondapak C18) s fluorescenční detekcí. Kvantifikace decoquinatu byla provedena na výšku píku. Nebyly nalezeny žádné interferenty a výtěžnost metody byla vypočtena na 101,6 % relat. se směrodatnou odchylkou 5,2 % pro finální krmiva a 104,3 % se směrodatnou odchylkou 3,6 % pro premixy. Stanovení nízkých obsahů decoquinatu v krmivech popsal Komoriya a spol.[3] Decoquinat je extrahován ze vzorku chloroformem a extrakt je přečištěn na silikagelu. Decoquinat byl stanoven na reverzní fázi C18 s fluorescenční detekcí za použití mobilní fáze methanol - 1 % CaCl2 (4+1). Výtěžnost metody pro obsahy decoquinatu 0,2 – 0,8 mg/kg byla vypočtena na 100,3 % relat. Simultánní stanovení lasalocidu, ethopabátu, nikarbazinu a decoquinatu v krmivech bylo rovněž popsáno.[4] Analyty jsou extrahovány ze vzorku za stálého míchání extrakčním roztokem methanol – voda (9+1). Po centrifugaci je supernatant odpařen k suchu a odparek je rozpuštěn v pufru pH 5,5 a přečištěn technikou Extrelut. Extrakt je analyzován na reverzní fázi C18 s gradientovou elucí s UV detekcí 254 nm a 313 nm. Nevýhodou metody je poměrně nízká výtěžnost, která se pohybuje od 70 – 90 %. Detekční limit pro nikarbazin a decoquinat je 0,05 mg/kg, pro ethopabát 0,2 mg/kg a pro lasalocid 1,5 mg/kg.
Většina HPLC metod stanovení decoquinatu v krmivech využívá extrakce ze vzorku, která byla popsána ve fluorimetrické metodě stanovení decoquinatu v krmivech.[5] Decoquinat je extrahován ze vzorku extrakčním činidlem 1 % CaCl2 v methanolu a decoquinat je reextrahován následně do chloroformu a chloroformový extrakt je přečištěn extrakcí kapalina-kapalina ředěnou kyselinou chlorovodíkovou (1+19). Chloroformová vrstva je zbavena zbytků vody odstředěním a chloroformový extrakt je přečištěn na pevné fázi Florisil. Kolonka Florisilu je promývána methanolem a decoquinat je poté eluován roztokem 1 % CaCl2 v methanolu. Extrakt se měří fluorimetricky s excitační vlnovou délkou 325 nm a emisní vlnovou délkou 390 nm.
Literatura
[1] Kinoshita M.: Shiryo Kenkyu Hokoku (Tokyo Hishiryo Kensasho) 16, 112 (1991) (CA:115:206318).
[2] Kinoshita M.: Shiryo Kenkyu Hokoku (Tokyo Hishiryo Kensasho) 14, 16 (1989) (CA: 111:95675).
[3] Komoriya T, Sasaki N., Harada H.: Shiryo Kenkyu Hokoku (Tokyo Hishiryo Kensasho) 18, 45 (1993) (CA: 119:93852).
[4] Ishikuro E.: Shiryo Kenkyu Hokoku (Tokyo Hishiryo Kensasho) 16, 128 (1991) (CA: 115:206319).
[5] „Decoquinate in Feeds“, AOAC Official Methods 969.55 v knize: „Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists”, 16 vyd., AOAC, Arlington, USA 1995.